質(zhì)粒小量提取試劑盒I型，Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column說(shuō)明書(shū)
上海遠(yuǎn)慕生物代理不同系列的進(jìn)口品牌試劑，美國(guó)Omega代理商，包含有：M-13單鏈DNA提取試劑盒，磁珠質(zhì)粒超大量提取試劑盒，瓊脂糖凝膠回收試劑盒，超薄柱型PCR產(chǎn)物純化試劑盒，96孔過(guò)濾板，一次性多道移液槍分裝容器，1.2ml帶蓋固定圓底收集板。其他Omega系列，了解更多進(jìn)口試劑，請(qǐng)！
名稱(chēng)：質(zhì)粒小量提取試劑盒I型
品牌：Omega
供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕
型號(hào)：Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column
用途：從小于5ml培養(yǎng)過(guò)夜的細(xì)菌培養(yǎng)液中純化約35ug質(zhì)粒DNA
Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column特性:
簡(jiǎn)單-硅膠柱過(guò)濾操作
快速-在30分鐘內(nèi)完成多個(gè)樣品的抽提工作
*-
美國(guó)Omega生物技術(shù)公司是一家專(zhuān)門(mén)從事核酸分離純化試劑盒研發(fā)與生產(chǎn)的企業(yè)，是一家zui早以硅膠膜純化為基礎(chǔ)的核酸純化公司之一，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的不斷奮斗和創(chuàng)新，Omega公司在此基礎(chǔ)上已經(jīng)發(fā)展出上百種的核酸純化試劑盒，包括了質(zhì)粒提取、DNA/RNA純化、基因組DNA提取、RNA提取、mRNA純化。特別是在基因組DNA和RNA提取這兩個(gè)系統(tǒng)中，Omega根據(jù)不同材料的特殊性，發(fā)展出了一系列針對(duì)性相當(dāng)強(qiáng)的試劑盒，如真菌，植物，昆蟲(chóng)，軟體動(dòng)物，土壤，糞便等樣品的DNA/RNA提取試劑盒，因而大大的方便了廣大的科研工作者。
Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column提取步驟：
1. 樣本處理收集已培養(yǎng)1216小時(shí)的菌液13ml12000rpm離心1分鐘，盡量吸除上清。 注：菌液較多時(shí)可以通過(guò)多次重復(fù)離心將菌體收集到1個(gè)離心管中。菌液收集量由菌濃而定收集菌體過(guò)多會(huì)反而降低裂解效果。
2. 懸浮向菌體沉淀的離心管中加入250ul溶液Ⅰ用移液器反復(fù)吹打或渦旋振蕩器*懸浮細(xì)菌細(xì)胞沉淀。
3. 裂解加入250ul溶液Ⅱ于細(xì)菌懸液中溫和地上下顛倒6~8次，使菌體充分裂解加1管混合1管確保溶液充分、及時(shí)的混勻。充分裂解后的菌液會(huì)變得相對(duì)粘稠為防止DNA斷裂避免劇烈混勻操作及裂解時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。
4. 中和加入350ul溶液Ⅲ, 立即溫和上下顛倒6~8次充分混勻，加1管混合1管。此時(shí)會(huì)出現(xiàn)白色絮狀沉淀靜置2分鐘12000rpm離心5分鐘，可適當(dāng)延長(zhǎng)至10min。
注：溶液Ⅲ加入后應(yīng)立即混勻避免產(chǎn)生局部沉淀。若上清液中仍存在微小白色沉淀，可重復(fù)離心后取上清。
5. 吸附小心地將上清液轉(zhuǎn)移至吸附柱中12000rpm離心30~60秒，棄收集管中廢液，然后將吸附柱重新套入廢液收集管中。若上清一次加不完，可重復(fù)操作轉(zhuǎn)移時(shí)不可吸入沉淀此步很重要。
6. 漂洗向吸附柱中加入600ul漂洗液PW使用前請(qǐng)檢查是否已加入無(wú)水乙醇，12000rpm離30~60秒。
7. 重復(fù)步驟6棄收集管中廢液。
8. 將吸附柱套于收集管中，10000rpm離心2分鐘。
注:此步驟不可省略目的是去除吸附柱中殘余的漂洗液因?yàn)槠匆褐幸掖嫉臍埩魰?huì)影響后續(xù)實(shí)驗(yàn),酶切PCR等。
9. 洗脫將吸附柱置于一干凈的1.5ml離心管中向吸附柱膜中央部位懸空滴加50~100ul溶解液TE或滅菌雙蒸水，pH值在7.0-8.5，室溫靜置2~10分鐘，12000rpm離心2分鐘，即得提取質(zhì)粒DNA于-20℃保存。
標(biāo)簽：質(zhì)粒小量提取試劑盒I型 Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column 質(zhì)粒小量提取試劑盒
