培養(yǎng)基滅菌的方法

    什么是培養(yǎng)基滅菌？培養(yǎng)基滅菌的方法有哪些？今天上海遠慕生物與您共享培養(yǎng)基滅菌的方法。

    一、熱滅菌的主要原理

    1.微生物的熱阻

    2.對數(shù)殘存定律

    3.理論滅菌時間的計算

    4.滅菌溫度的選擇

    二、滅菌方法

    1、高壓蒸汽滅菌：高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養(yǎng)基、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養(yǎng)基在愛制備過程中混入各種雜菌，分裝后應立即滅菌，至少應在24h內(nèi)完成滅菌工作。滅菌時一般是在0.105MPa壓力下，溫度121℃時，滅菌15~30min即可。消毒時間不宜過長，也不能超過規(guī)定的壓力范圍，否則有機物質(zhì)特別是維生素類物質(zhì)就會在高溫下分解，失去營養(yǎng)作用，也會使培養(yǎng)基變質(zhì)、變色，甚至難以凝固。將蒸餾水或自來水裝在三角瓶中，裝水量一般不超過瓶的2/3，用牛皮紙或硫酸紙包扎封口，然后放入高壓鍋中滅菌后即為無菌水。滅菌后的培養(yǎng)基可放到培養(yǎng)室中預培養(yǎng)3d，若無污染現(xiàn)象，則證明滅菌是*的，可以使用。暫時不用的培養(yǎng)基置于10℃下保存。含IAA或GA3的培養(yǎng)基應在1周內(nèi)用完，其他培養(yǎng)基zui多也不要超過1個月。

    2、過濾滅菌：一些植物生長調(diào)節(jié)劑及有機物，如IAA、GA3、ZT、CM等，遇熱容易分解，不能與培養(yǎng)基一起進行高溫滅菌，而要使用細菌過濾器濾去其中的雜菌。細菌過濾器與濾膜（孔徑0.45微米）使用之前要先進行高壓滅菌。過濾后的溶液要立即加入培養(yǎng)基中，若為液體培養(yǎng)基，可在培養(yǎng)基冷卻至30℃時加入；若為固體培養(yǎng)基，必須在培養(yǎng)基凝固之前（50-60℃）加入，振蕩使溶液與其他成分混合均勻。