使用緩沖液注意這些問(wèn)題

1) 緩沖液使用前必須過(guò)濾。

2) 溶劑、樣品易受到細(xì)菌和霉菌的影響，要注意清潔。

3)一般不能直接用有機(jī)溶劑做清洗沖洗。

4)梯度洗脫時(shí)，選低吸收值的緩沖液 ：

例如：梯度洗脫時(shí)，緩沖液與有機(jī)相應(yīng)預(yù)混，以防止析鹽。在保證峰不拖尾的情況下，盡可能選用低濃度的緩沖鹽，防止析鹽; 緩沖鹽濃度，一般用20～30mM基本上就可以了，如果流動(dòng)相中有機(jī)相含量高的話，流動(dòng)相中的鹽類(lèi)緩沖液濃度就不能過(guò)高，鹽的濃度起碼要保證在流動(dòng)相條件下不會(huì)析出。離子對(duì)緩沖液濃度要高一點(diǎn)，一般50～100mM。

緩沖液大量稀釋后pH變化在什么范圍內(nèi)？

緩沖液大量稀釋后pH只是比原來(lái)的溶液有很少的變化。因?yàn)橄♂屩螅瑫?huì)促進(jìn)緩沖溶液加速水解，其ph值會(huì)因此得到補(bǔ)償，而不會(huì)發(fā)生劇烈的變化。

由弱酸及其鹽、弱堿及其鹽組成的混合溶液，能在一定程度上抵消、減輕外加強(qiáng)酸或強(qiáng)堿對(duì)溶液酸堿度的影響，從而保持溶液的pH值相對(duì)穩(wěn)定。這種溶液稱(chēng)為緩沖溶液。緩沖體系由：

1、弱酸和它的鹽（如HAc---NaAc）

2、弱堿和它的鹽（NH3·H2O---NH4Cl）

3、多元弱酸的酸式鹽及其對(duì)應(yīng)的次級(jí)鹽（如NaH2PO4---Na2HPO4）的水溶液組成。