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使用緩沖液注意這些問(wèn)題
點(diǎn)擊次數(shù):394 更新時(shí)間:2022-12-27

使用緩沖液注意這些問(wèn)題

1) 緩沖液使用前必須過(guò)濾。

2) 溶劑、樣品易受到細(xì)菌和霉菌的影響,要注意清潔。

3)一般不能直接用有機(jī)溶劑做清洗沖洗。

4)梯度洗脫時(shí),選低吸收值的緩沖液 :

例如:梯度洗脫時(shí),緩沖液與有機(jī)相應(yīng)預(yù)混,以防止析鹽。在保證峰不拖尾的情況下,盡可能選用低濃度的緩沖鹽,防止析鹽; 緩沖鹽濃度,一般用20~30mM基本上就可以了,如果流動(dòng)相中有機(jī)相含量高的話,流動(dòng)相中的鹽類(lèi)緩沖液濃度就不能過(guò)高,鹽的濃度起碼要保證在流動(dòng)相條件下不會(huì)析出。離子對(duì)緩沖液濃度要高一點(diǎn),一般50~100mM。

1xPBS緩沖液.jpg

緩沖液大量稀釋后pH變化在什么范圍內(nèi)?

緩沖液大量稀釋后pH只是比原來(lái)的溶液有很少的變化。因?yàn)橄♂屩螅瑫?huì)促進(jìn)緩沖溶液加速水解,其ph值會(huì)因此得到補(bǔ)償,而不會(huì)發(fā)生劇烈的變化。

由弱酸及其鹽、弱堿及其鹽組成的混合溶液,能在一定程度上抵消、減輕外加強(qiáng)酸或強(qiáng)堿對(duì)溶液酸堿度的影響,從而保持溶液的pH值相對(duì)穩(wěn)定。這種溶液稱(chēng)為緩沖溶液。緩沖體系由:

1、弱酸和它的鹽(如HAc---NaAc)

2、弱堿和它的鹽(NH3·H2O---NH4Cl)

3、多元弱酸的酸式鹽及其對(duì)應(yīng)的次級(jí)鹽(如NaH2PO4---Na2HPO4)的水溶液組成。

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