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超純水(UPW)的制備和滅菌
點擊次數(shù):349 更新時間:2022-12-30



儀器、耗材

有刻度的玻璃硼硅酸鹽或消毒的塑料螺口瓶子
螺旋蓋
試紙
膠帶標(biāo)簽
純水設(shè)備
消毒鍋
日記本

實驗步驟

1.在瓶子上標(biāo)明日期、容量和批號。

2.經(jīng)過過夜循環(huán)后的第二天早晨,從純水器中放出約50ml水,分別用相應(yīng)的儀器測定傳導(dǎo)率(或電阻)和總有機(jī)碳(TOC)含量,記錄在日記本上。

3.如果水的質(zhì)量達(dá)到限定的標(biāo)準(zhǔn)(在25°C時,水的電阻≥10MΩ/cm,TOC≤10μg/L),就直接收集至標(biāo)注好的瓶子內(nèi)。

4.灌至一定的體積,例如,如果用于稀釋10倍濃縮培養(yǎng)基,就分裝成430~450ml,如果要用于滅菌,就留出10%的空間。

5.將滅菌指示器放人一個瓶子(消毒之后檢査,而后丟棄這個瓶子)。

6.用螺口蓋將瓶子密封,如果使用堿性玻璃,即有瓶子可能破裂,就將蓋子松開。

7.將瓶子擺放在消毒鍋內(nèi),放有消毒指示器的瓶子放置在中間。

8.關(guān)上消毒鍋,檢査設(shè)置:121°C,100kPa(15lb/in2),以后真空之后(postvacdeselected)運行20min。

9.開啟滅菌程序。

10.在循環(huán)完成之后,檢査打印出的記錄,確認(rèn)執(zhí)行的是正確的滅菌過程,記錄在本上。

11.放置,冷卻至50°C以下。

12.打開消毒鍋取瓶子,如果在高壓滅菌過程中瓶蓋松了,就在瓶子的溫度降到室溫時將蓋子擰緊。檢查滅菌指示器,確認(rèn)滅菌條件已經(jīng)達(dá)到,記錄在日記本中。

13.將瓶子于室溫短期存放。

14.根據(jù)需要補(bǔ)充至培養(yǎng)室備用,通過檢查滅菌指示膠帶來確認(rèn)瓶子是否已經(jīng)經(jīng)過滅菌處理。

注意事項

如果消毒過程中瓶蓋被打開了,在瓶子仍然是熱的時候?qū)⑸w子擰上可能會使某些瓶蓋內(nèi)的襯里在瓶子冷卻或瓶內(nèi)容物收縮時落入瓶子。同樣,第一次打開瓶子時,空氣會迅速地進(jìn)入瓶子,這會引起污染。因此,在滅菌過程中被打開的瓶子,應(yīng)使其在無菌環(huán)境中冷卻至室溫,例如在擰蓋之前將其保持在消毒鍋內(nèi)或放在層流罩內(nèi)。

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