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血液瓊脂培養(yǎng)基的制備實(shí)驗(yàn)方法
點(diǎn)擊次數(shù):431 更新時(shí)間:2023-03-30

  實(shí)驗(yàn)方法原理 血液培養(yǎng)基是一種含有脫纖維動(dòng)物血(一般用兔血或羊血)的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,因此除培養(yǎng)細(xì)菌所需要的各種營(yíng)養(yǎng)外,還能提供輔酶(如V因子),血紅素(X因子)等特殊生長(zhǎng)因子。 因此血液培養(yǎng)基常用于培養(yǎng),分離和保存對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求苛刻的某些病原微生物。此外,這種培養(yǎng)基還可用來測(cè)定細(xì)菌的溶血作用。

  實(shí)驗(yàn)材料 兔羊

  試劑、試劑盒 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基

  儀器、耗材 三角瓶平皿注射器

  實(shí)驗(yàn)步驟

  一、血液培養(yǎng)基配方

  二、器材

  1.  培養(yǎng)基

  牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。

  2. 儀器或其他用具

  裝有5~10粒玻璃珠的無菌三角瓶,無菌注射器,無血平皿等。

  3.  動(dòng)物

  健康的兔或羊。

  三、操作步驟

  牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基的制備(見實(shí)驗(yàn)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基)。

  2. 無菌脫纖維兔血(或羊血)的制備

  用配備18號(hào)針頭的注射器以無菌操作抽取全血(無菌采血操作見實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的注射),并立即注人裝有無菌玻璃珠(約3 mm)的無菌三角瓶中,然后搖動(dòng)三角瓶10 min左右,形成的纖維蛋白塊會(huì)沉淀在玻璃珠上,把含血細(xì)胞和血清的上清液傾人無菌容器即得到脫纖維兔血(或羊血)置冰箱備用。

  整個(gè)過程必須嚴(yán)格無菌操作,制備脫纖維血液時(shí),應(yīng)搖動(dòng)足夠時(shí)間以防凝固。

  3. 將牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基溶化,待冷至45 ℃時(shí),以無菌操作按10%加人無菌脫纖維兔血(或羊血)于培養(yǎng)基中,立即搖蕩,以便血液和培養(yǎng)基充分混勻。

  35-45℃時(shí)加入血液是為了保存其中某些不耐熱的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和保存血細(xì)胞的完整,以便于觀察細(xì)菌的溶血作用。同時(shí),在這種溫度時(shí)瓊脂不會(huì)凝固。

  4.  迅速以無菌操作倒入無菌平皿中,使成血液瓊脂平板。注意不要產(chǎn)生氣泡。

  5.  置37℃過夜,如無菌生長(zhǎng)即可使用。

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