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高氏1號(hào)培養(yǎng)基制備的操作步驟
點(diǎn)擊次數(shù):1101 更新時(shí)間:2023-03-30

  高氏1號(hào)培養(yǎng)基制備的操作步驟

  1、稱量和溶化 按配方先稱取可溶性淀粉,放入小燒杯中,并用少量冷水將淀粉調(diào)成糊狀,再加入少于所需水量的沸水中,繼續(xù)加熱,使可溶性淀粉wan全溶化。然后再稱取其他各成分,并依次溶化,對(duì)微量成分FeSO4 .7 H2 O可先配成高濃度的貯備 液,按比例換算后再加入。待所有試劑wan全溶解后,補(bǔ)充水分到所需的總體積。 配制固體培養(yǎng)基時(shí),將稱好的瓊脂放入已溶的試劑中,在加熱融化,最后補(bǔ)充所損失的水分。

  2、調(diào)pH 用試紙測(cè)培養(yǎng)基的原始PH,如果偏酸,用滴管向培養(yǎng)基中加入1mol/LNaOH,邊滴邊攪拌,并隨時(shí)用pH試紙測(cè)其pH,直至pH達(dá)7.6。反之,用1mol/LHCI進(jìn)行調(diào)節(jié)。

  3、分裝和加塞 將配制的培養(yǎng)基分裝入試管內(nèi),在試管口或錐形瓶口上塞上棉塞。

  4、包扎 加塞后,將全部試管用麻繩捆好,再在棉塞外包一層牛皮紙,其外再用一根麻繩扎好。用記號(hào)筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、配制日期。

  5、 滅菌 將上述培養(yǎng)基以1210C,20min,0.103MPa高壓蒸汽滅菌。

  6、擱置斜面 將滅菌的試管培養(yǎng)基冷卻至500C左右,將試管口端擱在玻璃棒上。斜面的斜度要適當(dāng),使斜面的長(zhǎng)度約為管長(zhǎng) 1/3。

  7、無菌檢查 將滅菌培養(yǎng)基放入37℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~28h,以檢查滅菌是否徹di。和改良的差別就在于有沒有FeSO4· 7H2O 高氏常常配完后變成褐色也是由于Fe2+氧化為Fe3+的關(guān)系,所以常常有人用螯合的FeSO4,防止氧化。


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