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PCR技術(shù)的各種變體了解一下
點(diǎn)擊次數(shù):326 更新時(shí)間:2023-04-03

  1.遞減PCR(touchdown PCR):前幾循環(huán)溫度逐漸下降。

  2.逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR):以由mRNA逆轉(zhuǎn)錄而來(lái)的DNA為模板,由此產(chǎn)生出來(lái)的DNA不帶有內(nèi)含子(基因中不具意義的段落),常應(yīng)用于分子克隆技術(shù)。

  3.熱啟動(dòng)PCR(hot start PCR):以高熱活化型核酸聚合酶進(jìn)行反應(yīng),減少非專(zhuān)一性產(chǎn)物。

  4.即時(shí)PCR(real-time PCR):PCR過(guò)程中利用螢光探針或染料定量檢測(cè),又稱(chēng)定量PCR(quantitative PCR)。

  5.巢式PCR(nested PCR):先用低特異性引物擴(kuò)增幾個(gè)循環(huán)以增加模板數(shù)量,再用高特異性引物擴(kuò)增。

  6.多重PCR(multiplex PCR):在同一個(gè)管中使用多組引物。

  7.復(fù)原條件PCR(reconditioning PCR):PCR產(chǎn)物稀釋10倍后重新放入原濃度的引物和dNTP等循環(huán)3次,以消除產(chǎn)物中的異二聚體。

  8.dsRNA合成(dsRNA replicator):合并使用high-fidelity DNA polymersae、T7RNA聚合酶與Phi6 RNA replicase;從雙股DNA轉(zhuǎn)錄為對(duì)應(yīng)的雙股RNA(dsRNA)。可應(yīng)用于RNAi實(shí)驗(yàn)操作。

  9.COLD-PCR(co-amplification atlowerdenaturation temperature-PCR):用以檢測(cè)突變或特殊等位基因的PCR應(yīng)用技術(shù)。

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