（1）電解質(zhì)：抗原和抗體通常為蛋白質(zhì)分子，等電點分別為pH 3～5和pH 5～6，在中性或:弱堿性的環(huán)境中，表面均帶負(fù)電荷，適當(dāng)濃度的電解質(zhì)會使他們失去一部分負(fù)電荷而相互結(jié)合，出現(xiàn)肉眼可見的凝集或沉淀現(xiàn)象：在抗原抗體反應(yīng)中，常用0.85%的NaCI溶液或各種緩沖液作為抗原、抗體的稀釋液，以提供適當(dāng)濃度的電解質(zhì)。

　　（2）溫度：抗原抗體反應(yīng)必須在適宜的溫度中進(jìn)行，一般為15～40℃，通常最適為37℃。一定范圍內(nèi)，溫度升高，可促進(jìn)抗原抗體分子問的碰撞機會，加速抗原抗體復(fù)合物的形成，加快可見反應(yīng)的速度，若溫度高于56℃，可導(dǎo)致已結(jié)合的抗原抗體再解離，甚至變性或破壞；溫度越低，結(jié)合速度越慢，但結(jié)合牢固，易于觀察。某些特殊的抗原抗體反應(yīng)，對反應(yīng)溫度有特殊要求，如冷凝集素在4℃左右與紅細(xì)胞結(jié)合最好，20℃以上反而解離。

　　（3）酸堿度：抗原抗體反應(yīng)必須在合適的酸堿度環(huán)境中進(jìn)行，pH過高或過低都將影響抗原:抗體的理化性質(zhì)，抗原抗體反應(yīng)的最適酸堿度為pH 6～8。此外，當(dāng)pH達(dá)到或接近顆粒性抗原的等電點時，即使沒有相應(yīng)抗體存在時，也會引起抗原非特異性凝集，即自凝，造成假陽性反應(yīng)，嚴(yán)重影響試驗的可靠性 。