elisa檢測中顯色常見問題的解決
 

所有檢測孔均無色
原因可能為酶結(jié)合物或底物失效、底物漏加（錯加）、陽性對照漏加或錯加，其中以酶結(jié)合物失效和底物錯加為常見。查找原因的方法是將酶結(jié)合物與底物直接混合，觀察有無顯色；如顯色則提示為陽性對照漏加或底物錯加所致；若不顯色，用新酶結(jié)合物與底物混合，觀察有無顯色；不顯色則提示底物失效，顯色提示原用酶結(jié)合物失效。在確定底物錯加或失效者，若來加終止液。可重新洗板再顯色。
 
所有檢測孔均顯色
原因多為洗板不凈（扎內(nèi)殘留未結(jié)合的酶結(jié)合物）或顯色時間過長。洗板是elisa檢測重要環(huán)節(jié)．應(yīng)嚴格按說明書進行，可以適當延長浸泡時間、增加洗滌次數(shù)ｌ～２次，否則極易導(dǎo)致假陽性（競爭抑制法為假陰性）結(jié)果。
 
質(zhì)控孔無色
一般為酶結(jié)合物活性降低所致（排除底物錯加、失效及漏加質(zhì)控物）。質(zhì)控物一般為臨界值的，是確定試驗成功與否的重要依據(jù)。陽性對照雖然顯色，但可以發(fā)現(xiàn)其吸光度變化較大，該批試驗須重作，防止弱陽性結(jié)果的漏檢。
 
底物有顏色
目前國產(chǎn)elisa試劑盒的色原底物常為Ａ、B兩種液體，分別為一定濃度的雙氧水和四甲基聯(lián)苯胺（TMB）或鄰苯二胺（OPD）溶液，他們都不穩(wěn)定，使用保存不當易產(chǎn)生顏色；在使用時發(fā)現(xiàn)有顏色（或各取一滴混合后顯色），說明他們變質(zhì)或已受污染，必須丟棄。
 
試劑盒的貯藏應(yīng)按說明書的要求，在elisa檢測中應(yīng)嚴格按照elisa的操作規(guī)則執(zhí)行，避免elisa檢測中的常見實驗問題。

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